Millipore通過聚合材料沉淀或拉伸制成的膜濾器,可用于多種應(yīng)用(如過濾、空氣顆粒物監(jiān)測)。濾膜性質(zhì)因其組成、制造方法、表面處理技術(shù)和孔徑而存在顯著差異。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因為缺乏必要信息而沒有獲得理想體驗,更重要的是,寶貴的樣本會遭受本可避免的損失。
超濾是大分子脫鹽、濃縮方便的方法,重復(fù)性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標(biāo)準(zhǔn)操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。
選對截留分子量,事半功倍:
如果目的蛋白是120kDa,請問應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒有統(tǒng)一的說法,是因為不同廠家的膜的截留分子量的定義不同。Millipore的超濾管采用其*的再生纖維素膜,定義為:一個確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的Ultracel®再生纖維素膜得率超過90%。
預(yù)過濾和深度過濾器:
1、預(yù)過濾:預(yù)過濾利用大孔徑膜濾器從樣品中去除大顆粒物(如污垢或沉積物),之后再利用孔徑更小的膜濾器進(jìn)一步過濾。在樣品制備過程中,可借助預(yù)過濾避免過濾器過早堵塞或結(jié)垢。
2、深度過濾器:深度過濾器可將顆粒物截留在內(nèi)部,而非過濾器表面。由于具有較高的顆粒截留能力,深度過濾器常用于預(yù)過濾。
3、粘合劑:粘合劑常用于非織造纖維基材料,可為最終產(chǎn)品提供塑形和強度。盡管玻璃纖維過濾器常使用粘合劑,但這類添加成分會降低熱穩(wěn)定性,并可能導(dǎo)致可溶出物污染樣品。
4、濾網(wǎng):濾網(wǎng)具有尺寸均勻的大孔徑和網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),用于去除大顆粒物(如細(xì)胞、蛋白質(zhì)、污垢),以澄清顆粒物分析溶液。